产品介绍: PicoGreen是荧光检测dsDNA并进行定量的一种产品, 这种方法非常灵敏。常用于分子生物学技术:cDNA 文库 的构建、亚克隆的DNA片段纯化及应用,比如进行DNA定 量、产物扩增和引物的进一步检测。常规的DNA含量的检 测方法是在260nm处测其吸光值。这种方法的主要缺点是核 苷酸、单链核酸和蛋白质对信号的影响很大,并且还会受到 核酸制备过程中污染物的干扰,无法区分DNA和RNA,而 且这种方法不灵敏(5 μg/mL dsDNA溶液A260 = 0.1)。 PicoGreen定量检测方法简单、方便,成为生物制品残留DNA 检测的标准。 PicoGreen只有与dsDNA结合后才发出荧光,并且所发 荧光强度与DNA浓度成正比。 PicoGreen可以检测出 25pg/mL - 1000ng/mL范围内的dsDNA,且线性较好(R2 >0.99)。 使用方法: 试剂制备 PicoGreen dsDNA定量试剂是以1 mL的浓缩液形式保 存在无水的DMSO(二甲基亚砜)中。实验时,配制操作 溶液:2×PicoGreen试剂,将浓缩液用1×TE(10 mM Tris-HCl,1 mM EDTA,pH7.5)按1:200的比例稀释。对于终体积为200 μL的检测体系,如果要准备足够的操作溶 液测定20个样品,可在2 mL 1× TE中加入10 μL PicoGreen dsDNA定量试剂;对应终体积为2mL的检测体系,检测20 个样品,则需要在20 mL 1× TE中加入100 μL PicoGreen dsDNA定量试剂。由于试剂容易吸附到玻璃表面,要在塑 料容器中配制。PicoGreen试剂见光易降解,因此要注意避 光保存。 溶液最好在配制好数小时内使用,以保证最佳结果。