BCA蛋白定量试剂盒
货号:BC-1200/ BC-1500
包装量:200次/500次
价格:¥180(200T)/¥395(500T)
产品特点:
•准确灵敏:BCA试剂的蛋白质测定范围是20-2000 μg/mL;
•快速:45分钟内可完成测定;
•在96孔板中进行;
•干扰因素小;
•不受低浓度的EDTA、EGTA、DTT、硫酸铵、脂类的干扰;
•标准曲线接近直线,可以单点定标。
产品组分:
组分 | BC-1200 | BC-1500 |
试剂 A | 100 mL | 250 mL |
试剂 B | 200μL | 500μL |
蛋白标准液 | 1 mL | 2.5mL |
保存条件:
蛋白标准液保存在4℃,其他试剂常温保存,有效期一年。
注意事项:
•若发现试剂中有沉淀,可搅拌或在37℃ 温育使其溶解,如发现细菌污染则应丢弃;
•高浓度的EDTA,EGTA,DTT,硫酸铵,脂类会影响检测结果,改用Bradford法测定;
•Reagent A和B应密封保存;
•试剂具有腐蚀性,如不慎接触皮肤眼睛等,请立即用大量清水冲洗,必要时请立即就医;
•本试剂仅用于科学研究。
所需设备:
•540-595nm的酶标仪一台,用96孔酶标板,在562nm波长测定最佳。用普通的分光光度计测定时,需根据比色皿的最小检测体积,按比例放大反应体系。
操作步骤:
1.配置BCA工作液:根据标准品和样品数量,将Reagent A和Reagent B按照50:1的比例配制,充分混匀;
2.样品配置:取样品1μL加入499μLAB混合液,混匀,在37℃放置30分钟,冷却到室温,测定OD562的吸光度;
3.标准曲线绘制与操作:取5支1.5ml离心管,按下表剂量在各管中加入试剂:
0μg | 4μg | 8μg | 12μg | 16μg | |
蛋白标准液(μL) | 0 | 4 | 8 | 12 | 16 |
AB混合液(μL) | 500 | 496 | 492 | 488 | 484 |
混匀,在37℃放置30分钟,冷却到室温,测定OD562的吸光度(540-595 nm之间也可接受),根据标准曲线计算出蛋白浓度。 |
注:样品和试剂的比可以按比例放大或缩小,微孔检测时,可以按比例缩小,但总体积不小于100 μL。
附注:
因为BCA法测定时颜色会随着时间的延长不断加深,并且显色反应的速度和温度有关,所以除非精确控制显色反应的时间和温度。如需精确测定,建议每次测定时都做标准曲线。
成分 | 相容浓度 |
Na2CO3 | 0.2M |
NaHCO3 | 0.1M |
BCA-2Na | 1% |
酒石酸钠钾 | 6.5 mM |
CuSO4·5H2O | 4% |