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科创生物:三维细胞活性药敏检测试剂盒使用说明书/Detection Kit Instructions

科创生物 / 2019-03-30 19:19:22

包装清单批号:见外包装标签

编号

名称

规格

CAB-s1

三维细胞

15ml

M-s1

细胞活性检测培养基

50mL

L-s1

四唑盐化合物MTS

15mL

1 产品概述

三维细胞活性药敏检测,以三维培养的细胞模拟组织器官中细胞生长环境,对外源性刺激物(药物、生物材料、环境污染物、辐射等)引发的细胞活性、细胞自噬、免疫响应等进行高通量的生物学检测。CAB-s1三维微组织是以FDA批准的海藻酸钠做为细胞支架材料快速包封细胞成三维微球,可以包被不同类型的细胞代表相应的组织器官细胞所生长的细胞外基质环境。此试剂盒可用于药物细胞活性检测和细胞机制研究等。

2 需自备耗材与试剂

15mL灭菌离心管,移液枪,酶标仪,96孔培养板

3 三维细胞用于药敏测试实验步骤

3.1  CAB-s1 包被于96孔板

将CAB-s1取出后,放置于15mL离心管中,自然沉淀后去除多余的上清,然后添加10mL的M-s1试剂,按照下图所示进行梯度分装至另外的15mL离心管中,最终按100μL/孔依次将其接种于96孔板中,置于37℃,5%CO2培养箱过夜。

备注:分装和接种时必须混合均匀,并至少用1mL以上枪头进行操作。

3.2三维细胞药物刺激

3.2.1 取出96孔培养板,小心的将细胞上清去除。

3.2.2 用M-s1试剂稀释药物至需求浓度,按120μL/孔直接加入至包被好的96孔板中,混匀,放置37℃,5%CO2培养箱培养至所需时间。

注意:去除上清时,如用真空泵,其吸力要适当控制,吸液枪头(普通黄色枪头)不要触及孔底部以防堵塞并造成三维细胞的破坏,药物配制相应浓度时,请尽量节省M-s1,原则上不可超过20mL

3.3细胞活性测试

3.3.1  取出96孔培养板,收集上清可用于检测细胞分泌因子。

3.3.2  剩余的三维细胞进行细胞活性检测,取出试剂三,倒入加样槽中,按120 μL/孔直接加入到96孔培养板,置于培养箱中孵育2-4小时。

3.3.3 待阴性对照和阳性对照形成明显的色差后,将培养板取出用排枪按100 μL/孔取上清溶液到新的96孔板中进行MTS的检测(吸光,波长490nm),并保存数据进行处理。

4保存条件

收到此试剂盒后,常温下保存,避免过度震荡,并请于15天内进行测试。

5注意事项

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

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